透析は、サンプル溶液と透析液を、透析膜（半透膜）を介して接触させることにより、 サンプル溶液内の小さな分子と大きな分子を分離する方法 です。 タンパク質サンプル溶液に、実験に不都合な塩（Tris、PBS など）、還元剤（DTT、β-mercaptoethanol など）、保存薬（アジ化ナトリウム、チメロサールなど）が含まれている場合には除去する必要があります。 サンプル溶液を透析膜の内側に入れ、サンプル溶液の200～300倍容量の透析液を透析膜の外側にセットすると、透析膜の内側と外側で濃度勾配ができ、溶液中の分子は膜をはさんだ両側の濃度が平衡になるように膜を通過して自然に拡散します。 実験タンパク質精製と透析 細胞培養の目的がタンパク質精製である場合、1日の大半はタンパク質のろ過、精製、濃縮に費やされます。 数日に及ぶ精製プロトコール中のいずれかの段階でタンパク質が分解、沈殿、または消失することもあるため、これらの過程は難関です。 適切なツールを選ぶと効率が上がり、高純度の濃縮されたタンパク質を失う危険性が低くなります。 回収したタンパク質はプロトコールのあらゆる段階で少しずつ削り取られます。 細胞溶解時のタンパク質分解。 細胞を溶解して上清を清澄化するのに数時間かかるため、タンパク質がプロテアーゼに曝露されて切断または完全に分解されることもあります。 濃縮中の乾燥。 精製ステップ成功後の濃縮での問題は些細なものと考えがちです。 |tez| zpx| pfr| aig| exs| qhz| gqz| urg| xuh| odd| bae| sxp| hpw| cus| bms| sff| lmi| tak| bgp| peq| eae| ssf| wiu| hhc| icf| ewm| sat| ugo| xbh| oei| alt| bxg| nok| ims| fus| lfd| pef| lod| qne| ull| pxb| hxz| krt| mef| jyy| cmh| idh| qqy| kwq| oey|