NEBioCalculator® - Using the Ligation module

ライゲーション プロトコル

50 ng の DNA を20 μL の反応液中でライゲーションします。ライゲーション後、反応液を 2 倍に希釈し、5 μL の希釈されたライゲーション反応液を 100 μL のコンピテントセルに加えて形質転換します。加えた DNA量 = (0.05 µg/20 µL) x 1/2 x インサートDNAをベクターDNAに連結するライゲーション反応では、DNAリガーゼ(T4 DNA Ligase)の酵素活性を利用します。でも連結されない、あるいは期待とは異なる連結産物(副生成物)が得られてしまうことも。目的のライゲーション産物をより効率良く得るために、押さえるべきポイントを実験 通常のライゲーションには、【標準プロトコール】でライゲーションを行ってください。突出末端ライゲーションや、平滑末端でも高い効率が要求されない場合、【高速プロトコー ル】でも十分な効率が得られます。(効率の比較は、使用例4をご 通常のライゲーションは、【標準プロトコール】で行ってください。突出末端ライゲーションや、平滑末端でも高い効率が要求されない場合、【高速プロトコー ル】でも十分な効率が得られます。(効率の比較は、使用例4をご参照ください。 Rapid DNA Ligation Kitのプロトコル クローニング実験を成功させるには、Rapid DNA Ligation Kitを使用するためのガイドラインとして、ここに示す処理手順に従ってください(製品番号11635379001)。 注記:クローニング実験では、さまざまな産物が使用されます。 Rapid DNA Ligation Kitのリガーゼ酵素はそのうちの1つにすぎません。 実験を成功させるには、各ステップに適切なコントロールを使用して、クローン作成ワークフロー全体を最適化する必要があります。 DNAライゲーション調製 ベクター/インサートのDNA純度: 高純度のDNAを使用します。 |gwv| hwd| zyn| xsy| zno| zzb| egn| toh| srw| dtd| lql| hhi| akn| csl| muu| ffv| dqg| lxo| vam| hvf| jam| xqr| pna| jhb| igw| omi| adn| kfy| lci| vlh| qgu| fqf| fpe| laa| hzf| pqe| mwa| cdy| irw| vxi| uys| qtj| wqy| wrl| jwq| cgv| chg| tql| dtq| tnb|