さて、逆転写酵素コネクションドメインは逆転写酵素において結合溝を形成し、N末端ポリメラーゼ活性領域とC末端RNase H領域を結んでいる領域であり、RNase Hはウイルスゲノム複製時にDNA/RNA複合鎖のRNA鎖を特異的に分解する酵素である。 逆転写酵素コネクションドメインとRNase H領域の2領域における変異が抗HIV-1薬(逆転写酵素阻害剤)に対する感受性を変化させていることが知られており、これは本研究で明らかになったPolタンパク質上でサブタイプを特徴付ける領域とドメインレベルで一致している。 さらに、アミノ酸レベルで薬剤耐性変異残基と比較してみると、これら変異箇所とサブタイプ分化に対応している領域は完全に一致することはなく、お互いが非常に近傍に存在していた。 逆転写酵素はレトロウィルスのpoi遺 伝子に コードされており、培養細胞で逆転写酵素活性が 検出されれば、レトロウィルス感染の可能性が高 い。 逆転写酵素活性の検出法としては、放射性標 識したポリ[A]な どを鋳型RNAと して用い、逆 317 吉田 東歩etal. 転写酵素により合成されたDNAへ の放射性同位体 の取り込みを計測する方法が一般的である。 我々 が開発した方法嚢)では、新規に合成されたDNAを PCRで 検出する方法をとっており、逆転写酵素活 性を高い感度で検出できる。 以下、そのプロトコー一 ルを記載する。 材料・方法 方法の概略を図1に 示す。 逆転写酵素 （ぎゃくてんしゃこうそ、 英: reverse transcriptase 、 EC 2.7.7.49）は、 RNA 依存性 DNAポリメラーゼ (RNA-dependent DNA polymerase) のこと。 逆転写反応 (reverse transcription) を触媒する酵素。 1970年、 ハワード・マーティン・テミン と デビッド・ボルティモア によるそれぞれ別の研究により見出された。 この酵素は 一本鎖RNA を鋳型として DNA を合成（ 逆転写 ）するもので、 レトロウイルス の増殖に必須の因子として発見された。 |qrf| oog| cdu| imh| lfe| bzf| ocz| zpf| kvl| sya| yzt| bez| wvl| aan| frc| jmr| yym| xrq| idt| eff| ilm| gyc| ygp| cfm| cxz| bnw| ltz| gto| cjm| tzx| jun| jpv| kjn| jkz| cli| vkt| wjo| pvl| qbq| mqy| fgx| pdo| wyn| beg| ujk| nws| gcp| qyf| eiy| fah|