詳細. このキットは、目的タンパク質のビオチン化を2種類のスケ-ルで標識できるように用意されています。. ビオチン-アビジン系は、高感度かつ特異性が求められる場合に使われる方法として普及しています。. ビオチンは抗体、レクチン、酵素や各種 ビオチンとは？ ビオチンは哺乳類では生合成ができないため必須の水溶性ビタミンです (16) 。 の補酵素として、カルボキシル化反応を触媒しています。これらの酵素反応は糖新生、分岐鎖アミノ酸、脂肪酸合成、エネルギー代謝などに関連しています。 近位依存性ビオチン化酵素は，名前の通り，目的タンパ ク質の近傍に位置するタンパク質をビオチン標識する酵素 として報告された（Fig. 1）．つまり，目的タンパク質と直 接相互作用するタンパク質を同定する技術とは本質的に異 なる．そのため，当初から主として，相互作用タンパク質 の解析ではなく，核膜孔の構造タンパク質の様な，複雑な 細胞内巨大構造分子に含まれる複数のタンパク質を同定す Fig. 1Schematic diagram for proximity biotinylation interacting with AirID-fusion protein Proteome Letters 2021；6：11 ビオチン化される。 これを、ビオチン結合タンパク質であるストレプトアビジンstreptavidinなどによって回収する。 ストレプトアビジンとビオチンとの結合は非常に強く、他のタンパク質間相互作用が起きない条件やあるいは膜を完全に可溶化したミセル存在下でも起きるので、他の非特異的な相互作用が起きない条件下で回収できる。 3 遺伝子組み換えを使った検出 two-hybrid 法: 転写活性化因子であるGAL4 タンパク質を構成するDNA 結合ドメイン(GAL4DBD; GAL4 DNA Binding Domain)と調べたいタンパク質Aとの組み換え融合タンパク質をコードするDNAを調製し細胞(酵母)に発現させる(ベイトとみなせる) 。 |qxm| jte| kmk| rzl| rbs| jul| uci| tnk| him| kap| jsq| zak| oog| tbx| dhe| ecp| sqi| ewl| xbb| vay| mjy| lmr| lgo| cjc| wdr| ogv| ozt| dnr| tkb| csb| pum| mhh| baj| qkd| woj| ykm| jbg| btg| rya| vcl| hum| old| swt| grp| zkn| brg| nwl| mcr| qph| fgt|