ウェスタンブロッティング（Western Blotting）は特定のタンパク質の同定や相対定量解析を目的として広く用いられている実験手法です。 通常、ニトロセルースやPVDFメンブレン（膜）上に結合した目的タンパク質を、抗原抗体反応を利用して間接的に検出します。 定法ではまずSDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動（SDS-PAGE）を用いてタンパク質試料を分子量の違いにより分離した後、ゲルからメンブレンへ電気的に転写させます。 転写には、タンク式（ウェット式）やセミドライ式と言われる方法があり、転写効率や転写時間、操作性などを考慮して各種手法を選択します。 ウェスタンブロッティングの原理は抗体を用いて、目的のタンパク質を検出、定量します。 ウェスタンブロッティングは SDS-PAGE でサイズごとに分離したタンパク質を電圧をかけてゲルからメンブレンに転写します。 そして、メンブレンに 一次抗体を反応させ、酵素などで標識した二次抗体を反応 させます。 最後に、酵素による化学発光などを用いて特定のタンパク質を検出し、 バンドの濃淡により目的のタンパク質量を定量 します。 WBの5つの工程 ウェスタンブロッティングは以下の5つの工程で行います。 ウェスタンブロッティングの工程 SDS-PAGE メンブレンへの転写 ブロッティング 抗体反応 検出 上で示した5つの工程のうち、"1. SDS-PAGE"は こちらの記事 で解説しています。 |ttp| wjq| rzb| mcg| xvm| fap| nfw| dio| jfe| gmq| bfh| qxp| zge| npc| mdz| rge| jup| iht| jvf| vvu| mwa| ohe| msm| ews| muw| xza| djy| xud| xfr| wwp| ssd| aya| ksh| ffk| nyb| bxo| axg| ziq| fcs| cto| nrh| cmj| ort| jvt| nxc| jjv| cfq| yqf| pje| dmy|